新冠病毒（SARS-CoV-2）逐漸出現(xiàn)更多的變異株，對(duì)人們的生命安全帶來(lái)威脅，全球范圍內(nèi)都迫切需要能提供更有效和廣譜保護(hù)的疫苗以克制新冠疫情的蔓延。

　　賽分科技客戶(hù)北京大學(xué)魏文勝課題組在國(guó)際頂尖雜志《Cell》發(fā)表題為《Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants》文章*，文中報(bào)道了circRNA疫苗技術(shù)平臺(tái)，并以此開(kāi)發(fā)了針對(duì)新冠病毒及其系列變異株的cricRNA疫苗，可有效中和Omicron、Delta等變異株。該項(xiàng)研究中采用賽分科技體積排阻色譜SRT SEC-2000制備circRNA，可以得到高純度的環(huán)狀RNA疫苗（circRNARBD-Delta）對(duì)多種新冠病毒變異株具有廣譜保護(hù)力。

背景介紹

　　目前，新冠疫情防控不能有絲毫松懈，而疫苗是有效應(yīng)對(duì)病毒傳染的措施?，F(xiàn)有新冠病毒疫苗一定程度上可以預(yù)防新冠病毒入侵，但效果仍有些差強(qiáng)人意，盡管最近有報(bào)道稱(chēng)，在接受兩劑疫苗接種后，用原疫苗進(jìn)行額外的接種可以增強(qiáng)防護(hù)效果、可以部分提高中和能力，但對(duì)于Omicron變異類(lèi)型的病毒的中和能力比野生型的低4~13倍。這對(duì)目前的疫苗療效提出了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)，突出了開(kāi)發(fā)針對(duì)這種快速傳播變種的有效疫苗的迫切性。

文章概述

　　文章報(bào)告了一種環(huán)狀RNA（circRNA）疫苗，它通過(guò)表達(dá)刺突蛋白的三聚體受體結(jié)合域（Receptor Binding Domain，RBD），引起有效的中和抗體和T細(xì)胞反應(yīng)，對(duì)小鼠和恒河猴對(duì)抗SARS-CoV-2提供強(qiáng)有力的保護(hù)。且對(duì)比于1mΨ修飾的mRNA疫苗，circRNA疫苗能夠產(chǎn)生更多、更持久的抗原，并引起更高比例的中和抗體和明顯的Thl傾斜的免疫反應(yīng)。其中circRNARBD-Delta對(duì)多種新冠病毒變異株具有廣譜保護(hù)力，使其成為對(duì)抗SARS-CoV-2目前關(guān)注的變體（VOCs）的有利選擇。

　　文章介紹的一種高純度circRNA疫苗制備方法，采用賽分科技SRT SEC-2000（5μm， 2000Å，4.6×300mm）色譜柱富集circRNA樣品，分五段采集（圖1），用凝膠電泳檢測(cè)收集樣品（圖2），circRNA實(shí)現(xiàn)很好的富集。收集富含circRNA的餾分，然后再進(jìn)行柱純化（圖3），將純化前后的樣品再次進(jìn)行凝膠電泳分析（圖4），得到高純度樣品，可用于后續(xù)藥效實(shí)驗(yàn)等操作。

圖1 circRNARBD分析色譜圖

圖2 餾分（圖1）收集凝膠電泳圖

圖3 柱純化圖譜

圖4 柱純化后凝膠電泳圖

　　賽分科技SEC色譜柱已被證實(shí)可以很好地應(yīng)用在環(huán)狀mRNA項(xiàng)目，本中采用的SRT SEC色譜柱用于制備高純度circRNA具有良好效果，在之前的文獻(xiàn)速遞欄目中，介紹賽分科技客戶(hù)蘇州科銳邁德在bioRxiv平臺(tái)上發(fā)表了用于癌癥治療的環(huán)狀mRNA應(yīng)用研究成果，其中介紹使用SRT SEC-1000制備柱用于純化circRNA得到高純度的樣品。

　　此外，MIT Daniel Anderson教授實(shí)驗(yàn)室發(fā)表在《Molecular Cell》雜志發(fā)表的文章同樣采用賽分科技 SRT SEC-2000這款色譜柱實(shí)現(xiàn)circRNA的純化。

　　[1] Liang Qu, Zongyi Yi, Yong Shen, et. Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants, Cell (2022),doi: https://doi.org/10.1016/j.cell.2022.03.044.

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